测定荧光可用荧光计和荧光分光光度计,两者的结构复杂程度不同,但其基本结构相似。它们通常都由激发光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统组成(图7‐。由光源发出的光,经单色器,让特征波长的激发光通过,照射到试样池,使荧光物质发射出荧光,经第二个单色器,让待测物质所发射的特征波长的荧光通过,照射到检测器产生光电流,经放大后记录。用荧光分光光度计测定的激发光谱和发射光谱往往有较大的误差,主要原因是光源的强度随波长的改变而有所改变、每个检测器对不同波长的光接受程度不同以及检测器的感应波长不呈线性。双光束荧光分光光度计,可用参比光束抵消光学误差。
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