二、Maxam‐Gilbert化学降解法测序

化学降解法与包括合成反应的链终止法不同，需要对原DNA进行化学降解。其基本原理是，首先对待测DNA末端进行放射性标记，再通过5组（也可以是4组）相互独立的化学反应分别得到部分降解产物，其中每一组反应特异性地针对某一种或某一类碱基进行切割。因此，产生5组（或4组）不同长度的放射性标记的DNA片段，每组中的每个片段都有放射性标记的共同起点，但长度取决于该组反应针对的碱基在原样品DNA分子上的位置。此后各组反应物通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离，通过放射自显影检测末端标记的分子，并直接读取待测DNA片段的核苷酸序列。如果做了A ＞ C反应，在该列中出现较强的条带时，可帮助A的确定。