1)膜制备:组织块称重,加入10倍体积的Tris‐HCl缓冲液,冰浴下匀浆、过滤,10000g离心10min,沉淀用缓冲液混匀,离心2~3次,用10mmol Tris‐HCl和2mmol Li Br提取45min,1000g离心10min,得均匀的细胞膜悬液,用Lowrry法测蛋白含量。自然生物膜存在有多种活性蛋白,药物分子可能与多种受体或通道蛋白结合,其容量因子(k ′)可反映药物分子与细胞膜上多种受体的协同结合效应。对于弥散分布或重量太小组织(某些神经核团,内分泌组织)尚无法进行常规CMC研究,此时常需要进行细胞原代培养或细胞株的传代培养,获得足量的细胞后才能进行CMC研究。
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