三、体内药物分析方法的建立

取待测药物、代谢物或内标物的对照品（或标准品），按拟定的分析方法进行测定，得到响应值与浓度间的关系，确定检测灵敏度和最佳检测条件。如采用高效液相色谱法时，可通过调整色谱柱（型号、牌号、填料性状与粒径、柱长度）、流动相（组分及其配比）及其流速、检测波长和柱温等条件，使待测药物、代谢物或内标物具有适当的保留时间和良好的分离度，且应避免内源性物质的干扰。一般可通过比较模拟生物样品和实际生物样品的检测信号来确定是否受到代谢物的干扰，如在高效液相色谱法中比较色谱图中被测定药物色谱峰的tR，n和T是否一致，必要时可通过光二极管阵列检测（HPLC‐PDA）或质谱检测（LC‐MS）确证被测定色谱峰的同一性。