第十二节 蛋白‐蛋白相互作用研究实验方法

蛋白‐蛋白之间相互作用存在于机体每个细胞的生命活动过程中，相互交叉形成网络，构成细胞中一系列重要生理活动的基础。研究已知蛋白间的相互作用主要是关注蛋白间能否发生结合，实验本身更趋向于验证性。如探索细胞中能与某一蛋白结合的所有未知蛋白质，则实验的关键是得到细胞中含有靶蛋白的复合体，经过有效的分离纯化后，逐一鉴定复合物中的各个组分。或采用一对多的筛选方法，如酵母双杂交，在建立的蛋白表达文库中检测可能与靶蛋白相互作用的蛋白质。本节介绍免疫共沉淀、GST‐pull down实验、荧光共振能量转移和激光共聚焦显微镜技术。