对照药材的提取:精密称取川牛膝对照药材粉末(过三号筛)1 ﹒ 0003g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20 ml,密塞,称定重量,加热回流1h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液,即得。对照品溶液的制备:取杯苋甾酮对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 ml含25.00 μ g的溶液,即得。样品有两个杂质与目标化合物保留时间十分接近,即使在4.6mm × 250 mm,5 μ m色谱柱上也很难分离,造成杂质与杯苋甾酮色谱峰的共流出,故HPLC方法的含量结果偏高。在原始方法梯度条件下,绝大部分的峰均在最后出峰,造成分析时间较长,前面的梯度时间浪费过多,本方法进行了相应调整。
……