[文献资料]三、蛋白质含量测定

蛋白质含量测定主要用于原液的比活性测定及成品中蛋白含量的确定。常用蛋白含量测定方法有凯氏定氮法、 Folin -酚试剂法（ Lowry法） 、双缩脲法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法等。其中前三种方法为药典法定方法。因为蛋白质含氮量通常在16%左右，因此凯氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25 ，即为该样品的蛋白质含量。依据蛋白质肽键在碱性溶液中可与铜形成紫红色络合物，其颜色深浅与蛋白质含量成正比。利用标准蛋白质溶液作对照，采用紫外-可见分光光度法在540nm处测定供试品的蛋白含量。通过测定595nm处光吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量。将供试品的吸光度代入即可算出对应蛋白质含量。但具有不同纯化蛋白间有可变性、蛋白不可逆变性等缺点。