[文献资料]四、梯度洗脱的实验条件

梯度洗脱的最大缺点是其重现性差，为获得理想的梯度洗脱分离效果和良好的重现性，在实验中必须考虑以下问题。一个周期梯度洗脱结束时，流动相的组成与梯度洗脱起始时已大不相同，为了进行下一次梯度洗脱，必须用起始流动相对色谱柱彻底平衡后，再重新开始梯度洗脱。在梯度洗脱中，有机溶剂B的浓度逐渐增加，通常有机溶剂如甲醇的紫外吸收大于水的吸收，因而若在梯度洗脱中使用紫外检测器，基线向上漂移是很普遍的现象，检测波长较低时这种现象更为严重。