核酸探针经典的标记方法是用32P放射性核素,虽然具有许多优点,但不可避免具有同位素的缺点,如效期短、需要特殊的防护设备和污物处理等。非核素标记物包括生物素(biotin)、地高辛(digoxin)、荧光素(fluorescein)及其他免疫半抗原(如AAF半抗原)、标记金属等。目前使用较广泛的有生物素和地高辛标记方法。按标记方法不同,非核素核酸探针标记法可分为两大类:①预先将非核素标记物连接于NTP或d NTP上,可以采用上述的核素标记的酶促反应使标记物掺入核酸探针中。直接与核酸进行化学反应将标记物连接于核酸上,形成标记核酸探针。另外由于光敏生物素能与任何有机物反应,因此用作标记探针的核酸必须高度纯化。
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