近10年来系统性真菌感染病例明显增多,真菌的获得性耐药株的出现及多种抗真菌药物的可选择性,使抗真菌药物敏感试验成为指导临床医生用药的手段之一。抗真菌药物敏感试验可分为定量试验和定性试验,定量试验可报告最低抑菌浓度(MIC),定性试验可报告试验真菌对药物敏感(susceptible,S)、中介(intermediate,I)和耐药(resistant,R)。 由于真菌药物敏感试验影响因素颇多,如真菌生长的速度、药物在体内的代谢、培养条件等,所以真菌药敏试验结果与疗效的一致性至今是本领域需要探讨的重要课题。本栏目将对与抗真菌药物敏感试验的判断标准;真菌药敏试验的方法学;真菌药敏试验的临床应用等相关的问题进行提问和回答。
答:1992年,NCCLS起草了《酵母菌的液体稀释法抗真菌药物敏感试验参考方案》,文件名称为M-27P,用于检测引起深部感染的酵母样真菌,包括念珠菌、光滑球似酵母和新生隐球菌等对两性霉
1答:初始方案产生于1998年,命名为M-38P,该方案包括微量稀释法和宏量稀释法,对曲霉菌、镰刀菌、波氏假性阿利什霉等丝状真菌有较好的一致性;2003年NCCLS对某些最低抑菌浓度(MIC)判定
2答:主要有5-FC、FCZ、ICZ、AmB和VCZ,见表:CLSI M-27A2方案规定的MIC参考范围*目前CLSI还未设定AmB对酵母样真菌的MIC参考范围
3答:CLSI于2003年颁布M44-P对酵母样真菌纸片扩散药敏试验的判断标准,但只提供氟康唑(FCZ)和伏立康唑(VCZ)的标准,见表:CLSI M44-P对纸片扩散法的判断标准(mm)
4答:CLSI颁布的M-38P是丝状真菌肉汤稀释法抗真菌药敏试验,内容并无丝状真菌敏感性折点,只是描述了测试方案,包括试剂配制、操作方法、质量控制等程序。在临床应用中,按日剂量与MIC
5答:主要根据以下5个因素制定折点:①该药物对各类真菌的MIC的分布;②该药物的血药浓度和组织浓度;③动物试验结果证明制定的折点的有效性;④临床试验结果证明制定的折点的有效性和
6答:新的标准加入PK/PD参数作为抗菌药物临床评价新指标,传统制定折点的方法仅以体外药效学为准,按最低抑菌浓度(MIC)、最低有效浓度(MFC)、抗生素后效应(PAE)等,单一体外药效学数据不能
7答:①Candida krusei(克柔念珠菌)对氟康唑天然耐药,现已颁布的氟康唑对念珠菌的判断标准不适用,不管体外药敏结果均应报告耐药;②AMB对念珠菌目前无判断标准;③伊曲康唑的折点仅适
8敏感性评价中“SDD”(剂量依赖性敏感)和“I”(中介)含义有什么不同?答:“SDD”:其含义是敏感性依赖于用药剂量,如当FCZ的MIC在16~32mg/L时加大用药剂
9答:可能是因为只有浓度依赖性药物加大剂量后可以改善药物的疗效,而治疗真菌感染的药物大多是浓度依赖性的,所以在真菌药敏试验时参入SDD的折点更有其重要意义。
10答:宏量肉汤稀释法;微量肉汤稀释法;琼脂稀释法;E-test方法;葡萄糖亚甲蓝琼脂扩散法;自动化系统ATB Fungus-3方法;氧化还原比色法;流式细胞仪测定法。但常用于临床的有:ATB Fungus-3方
11答:ATB Fungus-3试剂条包括16凹(cupules)形反应杯。第一对不含任何抗真菌剂,用作阳性生长对照。氟胞嘧啶包含一个高浓度一个低浓度2个稀释孔,另外的13对包含不同稀释度的4种抗真
13答:待测真菌均匀涂在葡萄糖亚甲蓝M-H琼脂上,贴浸泡了待测药物的纸片,经24~48小时培养,测定抑菌圈直径,按CLSI颁布的M-44-A的标准判断敏感性。
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