二、Maxam-Gilbert化学降解法测序原理

化学降解法测序的基本原理如图3-2所示。化学试剂作用的第一步是将某种核苷酸的特定碱基（或特定类型的碱基）进行化学修饰。第二步是经过修饰的碱基从糖环上脱落，进而使无碱基糖环两端的磷酸二酯键断裂，从而产生4套含有长短不一DNA分子的混合物，其长度取决于该组反应所针对的碱基在待测DNA全长片段中的位置。化学降解法的特异性基于第一步反应中肼、硫酸二甲酯，或甲酸仅与DNA链上小部分的特定碱基的作用，而第二步的哌啶断裂必须定量反应。A + G反应：甲酸使嘌呤环上的N原子质子化，从而削弱了腺嘌呤脱氧核糖核苷酸和鸟嘌呤脱 ......