第八节　实时荧光定量PCR中荧光定量标准曲线很重要

实时荧光定量PCR是通过对PCR扩增反应中每一次循环产物荧光信号的实时检测，从而对起始模板作出定量和定性分析。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也成比例增加，每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。在扩增过程中，荧光信号到达设定阈值时所经过的扩增循环次数为Ct值。Log浓度与循环数呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，根据样品Ct值就可以计算出样品中所含模板量。自 ......