第十节 消减杂交（SSH）

用于揭示机能干预组与对照组之间差异表达的基因，探寻与机能干预调节直接相关的调节基因或新基因。离心,每管加入：5 ×第一链合成缓冲液2 μ l，dNTPmix（10mM each）1 μ l，dCTP(1μl与9μl水混合后)1μl, AMV逆转录酶（20U／ml）1 μ l。取6μl置于另一套微量离心管中-20℃保存,用于酶切后电泳时的对照和双链cDNA的大小。离心,水浴（98℃，90s → 68℃，8h），立即进行第二次杂交。通过Northern杂交验证其基因存在的真实性及在机能干预后的组织或细胞标本中 ......