[文献资料]第一节 Sanger 双脱氧测序法

双脱氧测序法又称酶促反应测序法，最初是由Sanger和其同事创立的。它利用DNA聚合酶来合成单链DNA模板的互补链，DNA聚合酶不能起始合成DNA链，链延伸只发生在一个与DNA模板退火的引物的3 ′端，如图60‐1。脱氧核苷酸按碱基配对的原则加到延伸的引物链中，引物的3 ′端羟基与新加进来的核苷酸5 ′磷酸基团形成磷酸二酯键，因此，整个链的延伸方向是5 ′ → 3 ′。双脱氧测序法利用了DNA聚合酶能以双脱氧核苷酸（ddNTP）为底物的能力。耐热DNA聚合酶是DNA测序中最近使用的一类酶，因为它们能在高温 ......