第八节 凝胶阻滞试验（Gel‐retardation Assay）

观察能与某mRNA特异序列发生特异结合的某调节蛋白的活性或量，反映该核酸结合蛋白在机能变化中的基因转录调节作用。所要分析的调节蛋白位于胞浆中，因此使用胞浆提取物与同位素标记的某mR NA特异序列（即同位素标记探针）孵育，形成调节蛋白‐RNA特异序列复合物，得到总结合量。如果在复合物形成前用未标记该mRNA特异序列（即非标记探针）竞争，可观察竞争结合抑制试验。合成该特异序列,既用作与调节蛋白结合的RNA探针，又作为竞争结合物。应用pGL66质粒和SP6 RNA聚合酶标记RNA探针（Promega Ribop ......