第四节　灵活酶切以玩转克隆

在体外验证某一microRNA靶向结合于调控基因的3 ’ UTR区“种子”序列时，我们尝试将该基因含有“种子”序列的一段3 ’ UTR序列克隆至某一荧光素酶报告质粒荧光素酶基因的下游。由于采用的该报告基因质粒的荧光素酶报告基因下游没有克隆常用的多克隆位点，我们想要连接这段3 ’ UTR序列的DNA片段到报告基因质粒，就只能考虑通过荧光素酶基因下游仅有的一个Xba Ⅰ酶切位点。我们挑选了3个克隆小规模扩增制备质粒，在将质粒测序鉴定之前，常规对重组质粒用Xba Ⅰ酶切加琼脂糖电泳鉴定。酶切后电泳可见释放目的片 ......