[辅助检查]五、酶切反应与凝胶回收的常见问题及对策

DNA质量不好，纯度不高如纯化过程中蛋白、乙醇、酚类和氯仿去除不彻底，影响了酶的活性。解决对策：用酚/氯仿再抽提一次，70%冰乙醇洗3次。4 .洗脱的时候最好用加热到60℃的洗脱液洗脱，如果实在效果不好可以分两次洗脱。1 .回收PCR产物在进行PCR扩增的时候，给引物两端设计好酶切位点，一般说来，限制性内切酶的选择非常重要，尽量选择黏性末端酶切和那些酶切效率高的限制性内切酶，如BamH Ⅰ、Hind Ⅲ，提前看好各公司的双酶切酶所用的公用缓冲液，以及各酶在公用缓冲液里的效率。1）全量（10 μ L）加入至 ......

——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》

书名：《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》

栏目：基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第五章 DNA酶切与凝胶回收及常见问题对策(DNA digestion, gel extraction and strategies frequently asked questions) > 第三节双酶切的缓冲液交换

作者：郭葆玉

参编：

页码：182-185

版本：1

出版社：人民卫生出版社

出版时间：2010-12-01

▲ [解剖学、组织学]第三章血‐脑屏障与脑水肿

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