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(一)放射性标记的反义RNA探针的合成

1 ﹒将[ α‐32 P ] UTP或[ α‐33 P ] UTP、核酸库、DTT、逆转录缓冲液、RPA模板置于室温。每个反应体系加以下试剂:1 μ lRNasin(40U)。一般最后加T7 RNA聚合酶,用后赶紧将酶置于冰箱中。以上混合物在37℃孵育30分钟。3 ﹒放射性标记的RNA探针用酚‐氯仿抽提,将下列试剂加入反应管中。混成乳浊液,室温,14 000 × g,5分钟离心。4 ﹒将上面的液相转入新管,加50 μ l氯仿‐异戊醇(50 ∶.5 ﹒将上面的液相转入新管,加50 μ l 4M醋酸铵和250 ......

——《感染免疫学》
书名:《感染免疫学》
栏目:感染免疫学 > 第二章 感染性病原体免疫应答的检测原理及方法 > 第十节 免疫应答的体内检测 > 四、核糖核酸酶保护分析
作者:章晓联
参编:马运峰,王其龙,冯勇,刘俊,刘敏
页码:141-142
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2008-05-01
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