第二节 标签融合蛋白结合实验

标签融合蛋白结合实验是一个基于亲和层析原理的、分析蛋白质体外直接相互作用的方法。该方法利用一种带有特定蛋白序列标签（tag）的纯化融合蛋白作为钓饵，在体外与待检测的纯化蛋白温育，然后用可结合蛋白标签的琼脂糖珠将融合蛋白沉淀回收，洗脱液经电泳分离并染色。如果两种蛋白有直接的结合，待检测蛋白将与融合蛋白同时被琼脂糖珠沉淀（pull-down），在电泳胶中见到相应条带（图12-6）。标签融合蛋白结合实验主要用于：①证明一对蛋白分子是否存在直接物理结合。用已知蛋白分子作为钓饵,筛选细胞内与之相结合的未知分子。 ......