试剂:缓冲液(PBS/D‐Hanks)。消化酶(0.25%胰蛋白酶,0.1%Ⅱ型胶原酶)。培养液[ DMEM + Ham F12(1 ∶。1),100u/ml青霉素,100 μ g/ml链霉素,15%NCS ]。骨科手术中获得无菌成人松质骨,经PBS或D ’ Hanks液冲洗后剪成1mm3左右小粒﹒。剩余小粒移入培养瓶,加入培养液,使小粒均匀分布于瓶底。将培养瓶轻放入5%二氧化碳培养箱内。吸弃待传代培养瓶内培养液,缓冲液轻洗1次。细胞计数,根据所需密度接种培养瓶或板。将冻存管中细胞悬液移入离心管,加培养液 ......