[文献资料]一、机械分离培养法

动物：新生大鼠，24h。用眼科剪和眼科镊分离出胫骨、股骨、肱骨、尺骨和桡骨,尽量清除骨周软组织后即置于冷MEM分离液中。取上层细胞悬液,用MEM培养液稀释到所需密度（4 × 106／ml），按要求接种到盖玻片（1.8cm × 1 ﹒ 8cm）、薄骨片（Φ 1 ﹒ 5cm，20～50 μ m厚）或培养板，贴壁培养（5%CO2、95%空气，37℃湿热）30～60min。说明：该方法获得的破骨细胞可用于骨吸收功能分析（骨片培养）、迁移粘附研究（包被培养板培养）、凋亡及其他（盖玻片培养），如免疫细胞化学、原位杂交 ......