基本原理:依赖IL‐3生长的细胞系有肥大细胞系和髓样细胞系,如FDCP‐。1、32D、MC‐9,这些细胞在有IL‐3存在时呈剂量依赖关系,在没有IL‐3存在时于24~36h内停止生长并死亡。MC‐9是依赖IL‐3生长的肥大细胞系,在含IL‐3的完全培养基中长期生存和增殖。在培养液中存在的抗体可使Fc受体桥联引起IL‐3依赖细胞自分泌供自身增殖,现惟一的解决方法是加入抗Fc受体的McAb:2.4G2,这种抗体可抑制培养细胞上Ig聚集的结合。基本原理:固相载体对蛋白质的物理吸附作用、抗原抗体的特异性结合及连接于抗体上的酶与相应底物的反应。逆转录PCR所用的引物为:IL‐3 5 ′ ATGAGCCGCCTGCCCGTCCTG。
……