为什么ELISA技术可延伸和发展为酶联免疫斑点检测？

答：酶联免疫斑点试验（enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT assay）源自ELISA，又突破传统ELISA法，是定量ELISA技术的延伸和新的发展。两者都是检测由细胞产生的细胞因子或其他可溶性蛋白，他们最大的不同在于：

1. ELISPOT通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下人工计数斑点或通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表1个活性细胞，从而计算出分泌该蛋白或细胞因子的细胞频率；
2. ELISPOT为单细胞水平检测，比ELISA和有限稀释法等更灵敏，20万～30万细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。

因此ELISPOT最显著的优势是高灵敏度，细胞的分泌在其周围被直接捕获防止了被稀释、降解及被周边细胞受体结合的影响，并且通过测量单个细胞频率和细胞因子的分泌情况可确定免疫反应克隆增殖的程度和特异性T细胞的效应类别。