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方法学

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    • 霍乱弧菌药敏试验应选用哪些抗菌药?

      答:主要包括氨苄西林、阿奇霉素、复方磺胺甲噁唑、氯霉素、四环素和多西环素。必要时可选择一种酶抑制剂复方制剂、或头孢菌素类,甚至于碳青霉烯类。

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    • 什么是纸片扩散法?其原理是什么?

      答:纸片扩散法试验就是Kirby-Bauer(K-B)试验。是临床微生物学实验室最常规的药敏感性试验的方法。其原理是:将浸有抗菌药的纸片贴在涂有细菌的琼脂平皿上,抗菌药在琼脂内向四周扩

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    • 纸片扩散法主要包括哪几个操作步骤?

      答:该方法包含4个主要的操作步骤:①药敏平皿的制备;②待测菌的菌液制备;③菌液接种;④含抗菌药纸片的放置。完成上述前3个步骤后,放入35℃温室或温箱培养16~18小时后阅读结果。

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    • 如何进行规范化的K-B法操作?

      答:即上述4个步骤的规范化操作。①药敏培养平皿,M-H琼脂培养基(对胸腺嘧啶的核苷含量是否超标要用粪肠球菌ATCC 29212质控),培养基厚度约4mm等。②待测菌的菌液制备和接种:从过夜

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    • 如何正确地阅读K-B法药敏试验结果?

      答:将药敏平皿倒置,在反射光下测量。若链球菌属、嗜血杆菌属因血平皿或特殊营养物质补充平皿的影响,可将平皿盖移去,在反射光下测量。而对于某些特殊的细菌和抗菌药则需要采用透

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    • 保证纸片法药敏试验结果正确性的关键是什么?

      答:主要有以下几点:①优质的药敏培养基;②标准的细菌接种菌量;③正确含量的抗菌药纸片及保存环境;④合适的培养环境;⑤有效的质量控制;⑥训练有素的技术人员。以上条件缺一不可。

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    • 培养基对药敏试验结果的影响因素有哪些?

      答:①pH:pH的变化可对药敏试验的抑菌圈直径大小造成影响。如pH偏低将导致大环内酯类和喹诺酮类药物的抑菌圈变小或导致四环素类药物的抑菌圈直径变大。②培养基中含有能拮抗抗

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    • 培养基的质量控制包括哪些方面?

      答:操作卡:各微生物学实验室应建立标准的培养基操作卡,内容包括培养基的成分,配制及注意事项。培养基的质量要求:①配制记录:应注明培养基原料的开封日期、储存条件、有效期、有否

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    • 做药敏试验时,不同国家地区对培养基是否有不同要求?

      答:不同的国家由于参照的标准有所差别,故培养基的要求也有所不同。如美国CLSI标准文件要求纸片法药敏试验所用的培养基必须是M-H培养基;而英国参照的是BSAC标准文件,其要求的培

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    • 纸片法药敏试验的标准接种菌量是多少?

      答:菌液标准浓度为0.5麦氏单位,相当于1.5 × 108CFU/ml。接种菌液浓度过高,抑菌圈会变小,而产酶菌株则更能破坏药物的抗菌活性;反之,菌液浓度过低,抑菌圈就会增大。

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    • 影响抗菌药扩散及活性的因素有哪些?

      答:①抗菌药的分子量大小:分子量越小,抗菌药越容易在琼脂中扩散,敏感菌株形成的抑菌圈也就越大,如青霉素、磷霉素、利福平等。分子量越大,抗菌药则不易在琼脂中扩散,敏感菌株形成的

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    • 对于不同种类的细菌,纸片扩散法药敏试验的培养条件是否一致?

      答:有所差别。①大部分需氧菌的培养条件为:35℃± 2℃,空气培养,16~18小时。如肠杆菌科细菌、假单胞菌属细菌、葡萄球菌属、肠球菌属、霍乱弧菌等。②不动杆菌属、洋葱伯克

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    • 葡萄球菌属和肠球菌属细菌对不同抗菌药的培养时间是否一致?

      答:有所差异。葡萄球菌属和肠球菌属的常规培养条件均为:35℃± 2℃,空气培养,16~18小时。但在葡萄球菌属药敏试验中,检测苯唑西林、甲氧西林、奈夫西林和万古霉素时,培养时间

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    • 纸片扩散(K-B)法药敏试验的注意事项有哪些?

      答:K-B法药敏试验的注意事项主要有:①K-B法所用琼脂为标准的M-H琼脂,该琼脂具有以下几个特点:琼脂成分以及pH水平得到了严格的控制;M-H琼脂上同一抗菌药对同一株细菌的抑菌圈直径

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    • 纸片法药敏试验无任何抑菌圈出现,是报告抑菌圈直径为零吗?

      答:如果没有任何抑菌圈出现,应报告该药物的抑菌圈直径为6mm,因为抗菌药纸片的直径即为6mm。

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