[辅助检查]第二节 外源基因的表达和鉴定

利用原核细胞表达外源基因是基因工程最常用的方法。要实现外源基因在原核细胞中的表达，一般要经过外源基因的克隆、重组载体的线性化、外源基因的插入、重组载体的筛选、重组载体的诱导表达与表达产物的鉴定几个步骤（详见第三章）。用T7启动子在原核细胞中表达外源基因时，将外源基因克隆到有T7启动子的原核表达载体中，置于T7启动子的控制下，转化可以表达T7 RNA聚合酶的大肠埃希菌，在IPTG的诱导下，T7 RNA聚合酶得到表达，启动T7启动子控制的外源基因合成mRNA，表达外源蛋白。抗菌蛋白可采用体外抑菌试验、体内抗感 ......