第二节　引物设计惑与获

我是一名科研工作者，主要进行细胞凋亡过程中相关细胞因子作用机制的研究。首先我们从PubMed上找出XAF1 mRNA的CDS区，根据CDS区序列设计引物以对其进行扩增，然后构建到质粒载体上，即完成了XAF1的过表达质粒的构建。先从扩增序列的一端或两端各舍弃掉一段碱基设计引物，以全基因组cDNA为模板进行扩增，然后对扩增片段进行割胶纯化回收，此时得到的序列一端或两端有碱基缺失，然后再设计二次引物，在二次引物上加上缺失碱基，再以上述纯化的扩增片段为模板进行PCR扩增。所以，建议做PCR实验前用软件设计2 ～ ......