[速览]一、细胞DNA克隆原理

细胞DNA克隆最早是在20世纪70年代早期发展起来的。限制性内切核酸酶Ⅱ型的发现使细胞克隆成为可能，它是一种细菌酶，能够在含有小的特异识别序列（通常4～8bp长的所有位点）切割DNA。正常情况下，这些酶通过选择性切割外源性DNA保护细菌免受噬菌体的侵袭。利用DNA连接酶将靶DNA片段连接到载体分子之前，用同一种或能够产生同型末端的不同种限制性核酸酶分别切割靶DNA和载体分子，则DNA重组的构建易于进行。只要DNA序列是已知的，通常可设计特异PCR实验来检测其是否存在。 ......