随着对细胞信号转导机制研究的深入,这些过程的网络调控特征逐步被认识。每一次实验鉴定一种或几种蛋白质磷酸化的免疫印迹实验已不能满足信号转导网络研究所需要的规模化分析的需要。近年来,随着位点特异性抗磷酸化抗体种类的增加,集成这些抗体,辅以其他技术,可以达到一次分析多个磷酸化蛋白,甚至定量分析的目的。双向电泳分离的蛋白质点可以先进行胶上原位酶切得到肽混合物,再用磷酸酶处理肽段,因为MALDI-MS分析混合肽的能力较强,所以用其分析磷酸酶处理前后的肽段,确定发生磷酸化的肽段质量数,最后用串联质谱对磷酸肽进行序列分 ......