三、PCR反应基本步骤

PCR反应的基本步骤是在反应管中加入反应缓冲液、dNTP、引物、DNA模板和DNA聚合酶，混匀后加石蜡油封盖液面（目前有些PCR仪在无特殊要求时可不用）防止反应液的挥发，然后将反应管置于PCR仪中开始以下循环反应。人工合成的2条寡核苷酸引物在适当温度下分别与模板DNA扩增区域的两端按碱基互补配对结合，此时，DNA聚合酶便可开始合成新链。由于添加的引物分子数远大于模板DNA的分子数，因此引物与模板DNA形成复合物的几率远远高于DNA分子自身的复性。因此，PCR扩增产物将受到所加引物5 ′末端的限制，使终产物 ......