简述基于广范围PCR的基因测序鉴定病原细菌、真菌的技术流程

请简述基于广范围PCR的基因测序鉴定病原细菌、真菌的技术流程。

答:目前,大多数的DNA自动荧光测序仪均采用双脱氧链终止测序法。细菌的DNA测序鉴定,首先是提取细菌的基因组DNA,以PCR的方法扩增用于DNA测序的靶基因,然后以四色荧光染料标记的ddNTP测序试剂盒进行二次PCR,得到荧光标记的单链DNA混合物,毛细管电泳经过激光检测器逐个检测并将荧光信号转换为DNA序列,有效序列再通过互联网的远程通信技术进行DNA序列的比对,即获得细菌的鉴定结果(下表)。真菌的测序鉴定程序与细菌基本相似。

 DNA靶基因测序鉴定细菌的基本流程

DNA靶基因测序鉴定细菌的基本流程

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