血细胞免疫标记技术
| 1 | 答：流式细胞术（flow cytometry，FCM）可用于对悬浮于液体中的微小颗粒进行计数和分选，其特点是能通过多参数相关分析来对细胞的固有性质（如光散射）以及细胞的标记测定特征 [如表面受...... |
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| 2 | 答：流式细胞仪的构造十分精密，通过流式细胞仪的基本组成可以解读其对多种学科技术的合理应用： 鞘流系统：流体力学中的鞘流原理是流式细胞仪实现单个细胞测量的基础，需要说明的是，...... |
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| 3 | 答：研究结果表明，如果简单地让细胞悬液穿过检测光束，大约会有30%的细胞在流动中会明显地偏离轴心，并且有向流速较慢的区域聚集的趋势。这种现象会造成4个问题： 阻塞管路； 聚集的细...... |
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| 4 | 答：流式细胞仪的检测是基于对光信号的检测来实现的，包括对荧光的检测和对散射光的检测，所以在流式细胞仪中，光学系统是最为重要的一个系统，它由一系列进行光采集和光过滤的镜片组...... |
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| 5 | 答：流式细胞仪检测的精密度、准确度、荧光与散射光灵敏度、分辨率是影响流式细胞分析的重要因素，为了使流式细胞分析结果准确、可靠，并且在各实验室间具有可比性，在每次使用前均...... |
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| 6 | 答：流式细胞仪的分选功能可以按照所测定的各个参数将所需细胞从细胞群体中分离出来。1965年，Fulwyler首先报道了以墨滴喷射技术为基础的自动细胞分选仪。1969年，他对此做了进一...... |
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| 7 | 答：可用于流式检测的体液标本其抗凝剂有很多种，比如乙二胺四乙酸（EDTA）、ACD保养液（acid-citrate-dextrose，ACD）或肝素。对于骨髓标本来说，优先选择肝素抗凝而不推荐使用ACD抗凝，因其...... |
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| 8 | 答：有时标本采集后无法马上进行检测，为了使标本的保存时间延长，可以采用适当的方式固定细胞。例如用多聚甲醛或甲醛，但采用多大浓度、固定多长时间、对抗原的结构有无影响等尚需...... |
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| 9 | 答：在血液系统疾病的诊断中，常需要鉴别诊断细胞的系列特性。而一些系列特异性标志首先出现于细胞内或核内。例如髓系标志物髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）、B淋巴细胞抗原标...... |
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| 10 | 答：流式细胞技术的发展在很大程度上归功于现代单克隆抗体技术的发展。各种荧光探针标记的单克隆抗体，不仅使传统的免疫学检测实现了定量分析，更为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞...... |
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| 11 | 答：经过与荧光抗体孵育后的单细胞悬液在激光束的照射下，会产生不同波长的荧光。而每种荧光素分子都有各自的光谱发射范围，这些发射光谱之间存在相互叠加的现象，并且在某些情况下...... |
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| 12 | 答：进行流式分析时设置荧光染色对照是为了避免各种因素造成的假阳性或假阴性结果。可分为：① 阳性对照：用现有的试剂和标记方法检测已知的阳性标本，包括阳性试剂对照和过程对照，...... |
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| 13 | 答：为了使荧光定量检测的信号达到最佳，合适的荧光染料浓度在其中发挥着重要的作用。在溶液浓度较稀时，荧光强度与浓度呈正比关系，荧光强度随溶液中染料浓度加大而增强。但当达到...... |
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| 14 | 答：非特异性结合（nonspecific binding，NSB）是指在免疫反应中非抗原、抗体的结合。Fc受体结合抗体是导致NSB的重要因素。任何细胞上只要存在未被结合的Fc受体，都可能发生NSB。虽然...... |
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| 15 | 答：随着计算机技术的发展，现在可以使用图形化的方式对数据进行显示和分析，其中 “设门”成为流式细胞术数据分析中最为独特的技术。“设门”产生的前提是...... |
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| 16 | 答：随着流式技术的不断发展，目前已实现使用3个激光器同时对每个细胞进行多达8个以上参数的分析。多参数分析可有效提高分析结果的准确性，从多个角度对细胞的异质性进行研究。当...... |
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| 17 | 答：鉴于在采集血小板过程中有可能导致血小板体外活化，故在实际操作中常会采取一些方式来减少此现象的发生： 采血前患者或志愿者应空腹，但可以喝水，以免血管塌陷而导致进针困难； 用...... |
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| 18 | 答：血小板活化在动脉血栓形成中起着关键作用。血液中循环活化血小板（circulating activated platelets，CAP）增高可作为动脉血管病，如缺血性卒中、心肌梗死、周围血管病等疾病有局...... |
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| 19 | 答：网织血小板最早是通过光学显微镜下的血小板核糖核酸（ribonucleic acid， RNA）染色被观察到，为循环血液中的年轻血小板。有研究表明血液中网织血小板的数量与骨髓巨核细胞的血小...... |
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| 20 | 答：血小板计数是临床诊断与治疗各种原因引起血小板减少症的重要检查项目。当血小板计数20times;109 /L时，传统上认为必须给予患者血小板输注，否则患者将有致命的出血危险。血...... |
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| 21 | 答：免疫荧光染色后洗涤，可有效地去除背景荧光的影响，使阴性和阳性血小板的荧光峰分离更好，平均荧光强度值（median fluorescence intensity，MFI-R）增大，有利于结果的分析。免疫荧光染...... |
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| 22 | 答：人们在被细菌或病毒急性感染之后，会产生一系列的炎症反应，常伴有发热，白细胞增多等症状。通常来说，炎症对人类的机体是有利的，将帮助人类增加新陈代谢，分泌抗体抵御外来的 ldqu...... |
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| 23 | 答：分子生物学研究表明，人类白细胞抗原B27（human leucocyte antigen B27，HLAB27）代表一个由15个紧密相关的等位基因（Blowast;2701-2705）组成的家族，从而可将HLA-B27进一步分为15种...... |
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| 24 | 答：人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）是一种RNA病毒（逆转录病毒），属慢病毒类，分为两型：HIV-1和HIV-2。HIV-1型（全球广泛流行）于1983年由法国人Montagnier发现（Paster...... |
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| 25 | 答：临床上常使用网织红细胞来反映骨髓红细胞的生成功能，目前，国内大多数医院仍采用煌焦油蓝或新亚甲蓝染色，然后用显微镜进行网织红细胞计数。但镜检法计数精确性差，受人为因素的...... |
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| 26 | 答：随着研究的不断进展，认为脱氧核糖核酸（DNA）非整倍体的出现可能是癌前病变发生早期癌变的一个重要标志，故DNA倍体分析在临床上可被用来辅助判断肿瘤的良恶性。FCM分析细胞周期...... |
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| 27 | 答：凋亡细胞的一个重要特点是很长的一段时间里细胞膜的结构未受影响，其主要表现为：维持基本功能，如离子和大分子的屏蔽作用和具有功能的通道泵。根据不同状态下的细胞对染料的吸...... |
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| 28 | 答：作为一种生物学技术，流式细胞术可用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。因此临床上那些可用于制备单细胞悬液或本身就具有类似性质的标本都能使用流式细胞仪检测。...... |
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| 29 | 答：流式细胞术检测的一个重要检测对象就是细胞表面的标记测定特征（如表面受体、DNA），而白细胞在其不同的分化阶段和活化过程中可以出现或消失不同的分化抗原。正常造血细胞不同...... |
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| 30 | 答：免疫细胞化学染色是通过免疫学的基本原理即抗原抗体之间的特异性结合反应实现的，并经化学反应使标记抗体的显色剂显色从而确定细胞内的抗原如多肽和蛋白质，对其进行定位以及...... |
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| 31 | 答：免疫细胞染色是根据不同的标记物以及其在光镜和电镜下的可见性而分为不同的染色方法，包括免疫荧光法，免疫酶法，免疫亲和法，免疫胶体金法。免疫荧光法是将细胞的CD抗原的相应抗...... |
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| 32 | 答：白细胞分化抗原参与机体重要的生理和病理过程，免疫应答过程中免疫细胞的相互识别，免疫细胞抗原的识别、活化、增殖和分化，免疫效应功能的发挥；造血细胞的分化和造血过程的调控...... |
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| 33 | 答：修复抗原是因为常规的石蜡切片标本均用甲醛固定，使得抗原性物质形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇；蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。由此在染色时，要进行抗原修...... |
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| 34 | 答：胸腹水的细胞学检查是病理的日常工作之一，直接涂片法受胸腹水新鲜程度、细胞数量、退变度、涂片厚薄等因素影响，同时常规细胞涂片所收集的细胞数量少，常有大量红细胞，炎性渗出...... |
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| 35 | 答：荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性标记分子杂交技术，即以荧光标记的核酸探针与细胞...... |
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| 36 | 答：荧光原位杂交技术问世后，其多用于染色体异常的研究，近年来随着FISH所应用的探针种类的不断增多，使该技术不仅在细胞遗传学方面，而且还广泛应用于肿瘤学研究。原有的放射性同位...... |
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| 37 | 答：任何技术的发展都有不足之处，荧光原位杂交技术也不例外。荧光原位杂交技术的局限性表现在实验过程中对石蜡包埋或冰冻切片的难处理，样品自身产生的荧光，以及受探针来源的限制...... |
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| 38 | 答：根据荧光原位杂交技术探针的种类不同相应的用途也不同。分别是： 着丝粒探针，用于检测染色体数目异常如三体、单体等； 亚端粒探针，靠近端粒的200 000～300 000为染色体特异性DNA，...... |
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| 39 | 答：荧光原位杂交探针的大小可以从几Mb几百bp，探针的获得可通过克隆、酶扩增及化学方法合成，种探针的使用使得FISH技术成为一个多功能原位研究DNA和RNA结构和功能的方法。① 染...... |
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| 40 | 答：比较基因组杂交（comparative genomic hybridization，CGH）方法是近10年来发展的一系列多色荧光原位杂交技术其中之一。其原理是分别以不同的荧光标记肿瘤基因组的DNA和正常参...... |
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| 41 | 答：多色荧光原位杂交（multiplex fluorescence in situ hybridization，M-FISH）的原理是混合数种荧光色原，形成不同颜色的荧光探针，在一次杂交中使每一条染色体都涂上不同的颜色，可同...... |
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| 42 | 答：荧光原位杂交技术已被广泛用于遗传性疾病、肿瘤研究及临床诊断和治疗监测。在临床应用中，荧光原位杂交技术凭借其较高的灵敏度和特异度，已在产前诊断、实体瘤（乳腺癌、膀胱癌...... |
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| 43 | 答：荧光原位杂交技术在白血病的诊断和治疗中的用于主要包括诊断和鉴别诊断，治疗和预后分层，识别移植后骨髓细胞来源以及监测疗效检测。① 染色体异位形成的融合基因检测是利用...... |
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| 44 | 答：荧光原位杂交技术对标本的要求： 标本采集时间，初诊患者通常应在使用细胞毒性药物前或者停药1周后留取标本，因为细胞毒性药物（包括激素）可以影响血液病患者中期分裂象的数量或质...... |
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| 45 | 答：这是为了镜下计数的准确性而设定，根据标记荧光素的激发光与发射光波长，选择合适的荧光显微镜滤片。选择苯基吲哚（destination access point identifier， DAPI）检测滤镜，在10倍物...... |
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| 46 | 答：微量残留白血病（minimal residual leukemia，MRL）是指急性白血病诱导化疗或骨髓移植，达到临床和血液学的完全缓解，而体内残存微量白血病细胞的状态。估计此时仍有106 ～108 个白血...... |
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| 47 | 答：p53 基因是人体重要的抑癌基因，人类p53 基因定位于17p13，该基因编码一种分子量为53 000的蛋白质，命名为p53。p53蛋白主要集中于核仁区，能与DNA特异结合，其活性受磷酸化调控。17...... |
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| 48 | 答：血液恶性疾病的细胞-分子遗传学检测，首先进行常规染色体显带分析，获得全面的细胞遗传学信息。常规染色体显带分析失败（无中期分裂象）、结果不理想（可分析分裂象数量不足、染色...... |
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| 49 | 答：2013年版的 《血液病细胞-分子遗传学检测中国专家共识（2013年版）》中规定了荧光原位杂交技术结果描述规范：荧光原位杂交技术是核型分析的有力补充，其结果也必须遵循国际人类细...... |
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