答:流式细胞仪检测的精密度、准确度、荧光与散射光灵敏度、分辨率是影响流式细胞分析的重要因素,为了使流式细胞分析结果准确、可靠,并且在各实验室间具有可比性,在每次使用前均应对仪器进行校准,使仪器达到标准化。

光路校准是最关键的校准,其目的是使样本流处于激光束的中心,样本流与激光束发生相互作用的信号能够被灵敏地检测,信号脉冲有最大的幅度和最小的宽度,而且有良好的重复性。在散射光或荧光直方图中,峰的高度最高、宽度最窄。使用散射光和荧光均一的颗粒或微球,可以很容易使流式细胞仪的光路达到最佳校正。大多数微球大小的均一性比典型细胞的变异更小,荧光强度的变异系数(coefficient of variation,CV)较小,一般低于2%。

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