什么是菌群谱分析法(PAP)?

答:改良的PAP将经24小时培养的TSB(胰大豆蛋白胨肉汤)受试菌菌液用生理盐水稀释为10−3 和10−6,运用螺旋接种仪(Don Whitley spiral platers,West Yoekshire,UK)将上述菌液分别接种在含有0.5、1、2、2.5mg/L和4mg/L万古霉素的BHIA(心脑浸液琼脂)平皿上,以hVISA Mu3和VISA Mu50菌株为对照,37℃、48小时培养后作菌落计数。使用统计绘图软件GraphPad Prism(GraphPad;San Diego,CA,USA)进行万古霉素浓度和相对应的活菌数绘制相关曲线图(以横坐标为万古霉素的浓度,纵坐标为万古霉素浓度相对应的活菌落数),计算曲线下的面积,即AUC值。以受试MRSA的AUC值除以对照Mu3的AUC值。从获得的比值来判断是否为hVISA。其判断的标准是:AUC受试菌/AUCMU3< 0.9,为VSSA;0.9≤AUC受试菌/AUCMU3< 1.3,即为hVISA;AUC受试菌/AUCMU3≥1.3,则为VISA。

目前菌群谱分析法(PAP)被认为是确证hVISA的金标准。但此法费时费力、操作烦琐,也不适合常规实验室开展。宏量E-试验法敏感性和特异性较高,但费用昂贵,专家提议临床遇到万古霉素治疗MRSA无效或不理想时,宏量E-试验法可用于接受糖肽类治疗患者中MRSA分离株中hVRSA的筛选。如发现该MRSA为hVRSA可疑菌株时,再用改良的PAP法确证,以明确治疗方向。

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