显微授精的种类

透明带钻孔法

透明带钻孔法(zona drilling,ZD)和部分透明带切割法(partial zona dissection,PZD)。透明带是卵细胞外一层无细胞结构的糖蛋白,它的主要功能是识别精子,并选择性地让单个精子穿透透明带,防止多精受精。ZD是采用化学的方法,包括用酸化的Tyrode溶液或蛋白水解酶如糜蛋白酶来处理透明带。PZD是采用机械的方法用玻璃针刺破透明带,造成透明带上有一小的约为透明带周长的八分之一的裂口。1988年Cohen等最先采用机械方法刺破透明带,然后将卵细胞放入含精子的培养液中,使精子通过裂口处顺利穿透透明带,最终与卵子形成受精卵,发展成胚胎并成功地妊娠和分娩。该方法简单,对卵细胞造成的损伤较小。然而,PZD要求精子数目大于5×106/ml,而且多精受精率较难控制,对胚胎的进一步发育也有影响。

透明带下授精

透明带下授精(subzonal insemination,SUZI)指将精子通过显微注射法直接注入到卵黄周围间隙(perivitellinespace,PVS)。该方法最早由Ng等于1988年获得成功妊娠。1990年Fishel等报告第一例成功分娩,该方法很快被许多IVF中心接受。受精率的高低与注射的精子多寡有关,注射的精子愈多,受精率也愈高,但多精受精率也随之升高,一般以注射3~5个精子为宜,超过8个精子可致100%多精受精,完全无运动的精子症如尾部纤毛结构异常的,丧失运动能力的精子采用SUZI能成功受精。将顶体完整的精子注射到PVS,并不能与卵子的质膜发生融合,只有将发生了顶体反应后的精子注射到PVS受精率才明显增加。然而SUZI受精率仍然不是很理想,大约为15%~20%,而且多精受精率难以控制。

无论是SUZI还是PZD,精子在与卵膜结合之前都必须自发的发生顶体反应。然而,体外诱导顶体反应对改善他们的受精率无明确作用,因此大大限制了其临床应用。

ICSI

ICSI技术通过选择活的精子、制动精子并在确保质膜破裂之后将精子注入卵细胞质内,使其受精。正常受精率远远优于PZD和SUZI,可达65%以上,着床率超过20%,因此有更多的胚胎可供移植,能取得较高的临床妊娠率。由于克服了IVF、PZD、SUZI等技术的一系列不足和限制,因此ICSI在临床上得到了广泛的应用。

ICSI最初应用于严重男性不育,由于ICS1种植率比常规IVF高,其应用范围逐渐扩大,包括既往常规IVF受精失败、不明原因不育,甚至用于年龄大于38岁的女性。用于ICSI的精子可以是射出精液的精子,也可以是来自附睾和睾丸的精子,1994年Oyura等利用圆形精子细胞进行ICSI取得成功,Sofikitis等用圆形精子细胞核进行ICSI治疗取得成功。1995年Tesarik用长形精子细胞治疗取得成功。圆形精子细胞与精原细胞、精母细胞、白细胞不宜区分,而长形精子细胞较易区分;在激活卵细胞能力方面,长形精子细胞优于圆形精子细胞。但由于确认圆形精细胞困难以及未成熟精子受精可能带来的基因缺陷难以估计,其临床应用较少。但Bhattacharya等近期报道,ICSI对非男性因素的治疗没有优越性。一些前瞻性研究显示,对中等程度畸形精子仍然以常规IVF为首选。

ICSI绕过了精子自然受精过程的屏障(如精子穿过透明带、顶体反应等),并且与常规IVF相比,ICSI在显微操作过程中可能损伤细胞骨架或减数分裂中的纺锤体,因此其安全性受到人们的关注。因为非阻塞性无精子症的染色体异常率高,另外,有推测睾丸精子在受精时染色体印迹并未完全结束,虽然可能对受精和胚胎早期发育影响不大。但可能导致出生后的异常。比利时Brussels组追踪调查了229个经ICSI和133个经常规IVF出生的2岁幼儿,并未发现ICSI的幼儿智力发育迟缓,但其性染色体非整倍体率和结构异常率有轻微的增高。尽管现有的研究显示目前ICSI并不提高先天性畸形的发生率,但不容置疑ICSI存在一定的遗传风险。ICSI婴儿中性染色体非整倍体的发生率为0.6%,高于正常人群的0.2%;可遗传的染色体异常(大部分来自父亲)的数目也有所增加。Silber等认为Y染色体微缺失可以100%传给下一代。为了减少ICSI的遗传风险,应进行严格的遗传学检测,如染色体核型分析、Y染色体微缺失的分子检测等方面。

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小程序

内容拓展

    显微授精的方法

    精液准备精子除了来自于体外排精外,还可以通过显微外科手术获取附睾中精子和睾丸组织中精子。此外还可用睾丸组织中长形精子细胞进[显微授精技术]

    显微授精适应证

    严重的少、弱、畸精子症 严重少精子症,一次射精的活精子浓度<1×106/ml;少弱畸精症,精子浓度<20×106/ml,同时a+b级运动精子[显微授精技术]

    显微授精技术的应用发展

    显微注射技术早在20世纪60年代就已开始,主要用于体细胞核移植实验,但同时也开始了动物精子显微注射的研究。进入20世纪70年代后,在畜[显微授精技术]

    人工授精的并发症及其处理

    自然周期人工授精的并发症较少,用药促排卵周期的并发症较多,人工授精的操作可能发生少量阴道出血、腹痛、感染、休克。促排卵药物的[人工授精]

    人工授精的实施

    自然周期人工授精一、卵泡监测:自然周期人工授精通常从月经周期的第10d开始采用B超监测卵泡发育。血E2水平检测也可作为卵泡发育的[人工授精]

    人工授精时间的选择

    人工授精时间的选择,是决定人工授精成功的重要环节。授精时间选择在女方的围排卵期,即排卵前日、排卵日、排卵后日。随着检测技术的[人工授精]

    人工授精前的准备

    人工授精前,男女双方需进行体格检查和实验室检查,以确定人工授精的适应证、是否适合妊娠。女方检查:主要检查项目包括体格检查和妇科[人工授精]

    人工授精适应证和禁忌证

    适应证施行人工授精的基本条件是通过子宫输卵管碘油造影或腹腔镜检查证实至少一侧输卵管通畅。夫精人工授精: 精液异常 轻度或中度[人工授精]

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