精子制备:玻璃纤维过滤法

玻璃纤维具有滤过作用,精液以一定的速率通过时,可以清除精液中的不活动的精子、其他细胞及杂质,特别是对黏滞性较大的标本,可除去大量的凝集精子,增加精子的活动率。玻璃纤维过滤法是用一个5英寸长的Pasteur吸管,管内填入一定数量的玻璃纤维丝,填入的玻璃纤维应松紧适当,若太紧,即使活动力再好的精子也不能通过,而太松,则不能阻挡精液中的死精子、细胞碎屑、细菌、白细胞及其他微生物等。将玻璃纤维丝填满后,用培养液反复冲洗滤过,直到滤过液中无玻璃纤维碎屑存在,然后将Pasteur吸管垂直固定于试管架上,将液化后的精液加在玻璃纤维柱的顶端,其下面用一个无菌无毒的玻璃容器收集滤出的精液。在收集到的精液中,虽然损失了相当多的精子,特别是质量较差的精子,但其几乎保留了所有的活动精子,因此,显著提高活动精子、前向活动精子及有完整功能性膜的精子的百分率,尤其对精液质量较差的标本效果更佳。

多数学者认为,通过此法收集到的精子,较其他方法更能有效地除去非活动及形态异常的精子,且回收率较高。但也有人发现,虽然其精子的回收率高,但精子的直线运动速度低于上游法,可能与本方法引起精子的超微结构损害有关。因此,本方法在临床上应用较少。

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