为什么需要建立粒细胞-单核细胞祖细胞集落形成单位的培养体系?

答:粒细胞-单核细胞祖细胞集落形成单位(CFU-GU)的培养体系如下:CFU-GM培养的刺激物含多种造血生长因子,这些细胞因子包括粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)、粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)以及白细胞介素(IL)-3等,但常用GM-CSF。培养基多用IMDM培养基(Iscove’s Modified Dulbecco’sMedium)和RPMI培养基(Roswell Park Memorial Institute)等。培养体系通常包括20%~30%胎牛血清,50ng/ml GM-CSF,细胞悬液中细胞总数一般以(1~2)×105 /ml为宜,剩余用IMDM或RPMI补齐,但通常保持琼脂终浓度为0.3%,甲基纤维素终浓度为0.9%~1.0%。细胞一般置于直径为35mm的培养皿或6孔板中,放置于37℃、5%CO2 饱和湿度环境下培养。一般在培养体系中培养10~14天,观察细胞集落,大于40个细胞的细胞团为一个集落,进行细胞集落计数。