精浆锌的检测

检测男性精浆中锌的水平,主要用于医学临床上前列腺炎和男性不育的体外诊断。精浆锌浓度低于正常参考值下限,提示前列腺分泌功能低下,可能与感染或男性不育有关。精浆锌浓度高于正常参考值上限,可能与死精子症或阻塞性无精子症有关。

一、检测原理

测定体液中锌含量的一种比色分析方法适用于精浆中锌浓度的检测。精浆样本中的锌可与显色剂反应生成有色复合物,颜色的深浅与精浆中锌的浓度成线性关系,根据锌标准液的浓度可以计算出精浆中锌的浓度。已有测定精浆中锌浓度的试剂盒出售。

二、所用试剂

  1. pH10的缓冲液:6g氯化铵加20ml蒸馏水,再加57ml 25%的氨水,补充蒸馏水至100ml;
  2. 镁遮蔽液:10g SDS加500ml蒸馏水,再加10g氟化铵,补充蒸馏水至900ml;
  3. 锌标准液(15mmol/L):4.3131g硫酸锌加蒸馏水至1000ml。稀释10倍成应用液1.5mmol/L;
  4. PAN[1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚]溶液:100mg PAN溶于100ml甲醇中;
  5. 反应液:100ml缓冲液,加900ml镁遮蔽液,加20ml PAN溶液。

三、操作步骤

基本操作步骤为:取3支试管,分别标记为空白管、标准管和测定管,按下表加样。

加好样后,混匀,以空白管调零,用1.0cm比色杯,在554nm波长下读取吸光度。

结果计算:精浆锌(mmol/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×1.5

精浆锌测定的操作步骤

精浆锌测定的操作步骤

 

四、正常参考值

精浆锌的正常参考值为0.8~2.5mmol/L。

五、方法学评价

本方法只适用于检测精浆中游离形式的锌,而不能检测与蛋白质结合的锌。为防止对检测结果产生影响,检测过程中需注意:①所用器皿必须经硫酸或盐酸浸泡过夜,然后洗净备用,若用一次性聚乙烯试管效果更佳;②整个操作过程都要严格防止污染;③尽快分离精浆,及时测定;④比色杯尽可能专用,以免污染而影响测定结果;⑤加入反应液后,应在30min内完成测定;⑥标准品的吸光度常稳定在一定范围内,如果吸光度过高或过低,需进行确认试验,找出影响结果的可能因素。

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