精液的免疫学检查方法学评价

ELISA法、IBT试验和MAR试验均可用于抗体的分型(IgG、IgM和IgA),不同的是,ELISA法的最大优点是可以同时检测大量标本,并可以检测抗体滴度;MAR试验和IBT试验必须每个样本单独检测,而且,如果检测精浆、血清或宫颈黏液中的AsAb时,需要新鲜的高质量的精液,这就大大限制了其临床应用。但MAR试验和IBT试验比较直观,可以直接观察到免疫珠或颗粒与精子的凝集现象,并且可大体确定AsAb在精子表面的位置,从而为临床治疗采取何种措施提供参考。而ELISA法不能检测精子表面结合的抗体。因此,不同的实验室可根据自身实验室的条件和患者量而决定采取何种检测方法。

为了保证检测结果的准确可靠,不论是ELISA法还是MAR试验或IBT试验,在检测标本的同时均应同时检测相应的阳性对照和阴性对照,只有阴、阳性对照完全吻合,样本的检测结果才有保证。

MAR试验和IBT试验中,供者精液的精子活力要有保证,观察结果时要注意只观察黏附有颗粒或免疫珠的活动精子,而非前向运动精子靠近免疫珠或颗粒时要加以鉴别,而且,颗粒或免疫珠与精子尾尖的结合应忽略不计。MAR试验和IBT试验对黏附颗粒的活动精子进行评分时,应在孵育3min和10min时分别检测一次,如果10min时活动精子全部结合上颗粒或不再活动,以3min时的数值作为试验结果;如果10min时的检测结果低于3min时的结果,应考虑是否有判断或记录误差,因为真正的抗体结合应该是颗粒逐渐凝集成团。由于IBT法和MAR法需要正常生育男性精子,而且每个标本需分别操作,很难满足我国男科实验室大量患者的需求,因此,在我国这两种方法使用相对较少。

目前市场上有不少厂家提供ELISA法AsAb检测试剂盒,但检测结果差异较大。因此,临床医生应慎重看待AsAb检测结果。由于目前用于检测AsAb的抗原基本来自用不同方法处理的精子膜抗原,因此成分比较复杂,相应的非特异性反应亦较多。建议临床上检测的阳性标本,用另一品牌的AsAb试剂盒再次检测,只有两种试剂盒检测均为阳性结果方可报告临床,如果两者结果不一致,建议用第三家品牌的AsAb检测试剂盒核实。

ELISA检测为阳性的精液标本,建议以MAR试验或IBT试验进一步验证。

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