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成熟B淋巴细胞的特征

成熟B淋巴细胞表面免疫球蛋白。B细胞的基本功能和特征是能够合成免疫球蛋白(Ig),是体内唯一合成Ig分子的细胞。B细胞静止期时有Ig镶嵌在细胞膜上(mIg),mIg可作为B细胞的标记。Ig分子依赖其重链C末端的疏水性片段与细胞膜的结合。B细胞表面可携带50 000~150 000个Ig分子,但是Ig的表达依分化阶段的不同而有变化。用荧光染料标记的抗免疫球蛋白的荧光抗体检测mIg时,抗抗体不一定总与免疫球蛋白相结合。多价特异性抗血清可检测到所有的免疫球蛋白类型,而类型特异性抗血清只结合免疫球蛋白的某些特异性类型。人类外周血mIg阳性的细胞数由于技术原因可发生变化,抗免疫球蛋白抗血清(抗抗体)具有与Fc受体非特异性结合倾向。胃蛋白酶消化抗抗体,去除Fc片段,用其F(ab2)片段,可以避免出现B细胞非特异性标记。有些具有Fc受体的淋巴细胞可以黏附上免疫球蛋白,造成假阳性,计数为B细胞。一些人类的自身免疫性疾病患者血清含有抗淋巴细胞抗体,通过Fab片段可以结合到细胞表面。正常情况下T细胞表面无mIg,这些抗T细胞抗体使B细胞计数表现为假阳性升高。单核细胞也可因为它们的Fc受体而与抗免疫球蛋白抗体非特异性结合。除外这些技术问题,mIg仍是B细胞一个有用的标记。

应用免疫荧光技术确定mIg要求在活细胞进行。相反,胞质免疫球蛋白可在固定后的细胞中检测。在活细胞检测中,抗体不渗入淋巴细胞内,因此荧光呈点状围绕细胞周边而呈环状。淋巴细胞在4℃条件下可与抗Ig抗体反应,当温度升高时,mIg在与抗Ig抗体反应后重新分布到细胞的一侧(帽状),最终进入细胞,使细胞表面无mIg。

B细胞系统mIg的发育分化过程:首先表达IgM。胎儿期IgM+细胞集中在淋巴结,在孕16~20周时定居于初级淋巴滤泡。孕13周时,多数B细胞为IgM+IgD+,之后出现IgG或IgA。胎儿B细胞的这种三表型形式持续到出生,在出生后的数月中转变为成人的单表型形式。在成人,表达IgG或IgA的细胞多于IgM和IgD。10岁时,几乎所有脾脏的B细胞为IgM+IgD+,而在骨髓中仅3%~4%表达两种同型表型。B淋巴细胞的成熟从表面IgM高IgD阴性到IgM高IgD低,最终到IgM低IgD高的转变相关。B细胞成熟过程中,除了表面免疫球蛋白以外,还表达不同蛋白分子。通过单克隆抗体的应用,大约有10种B细胞特异的细胞表面分子被发现。新的标记与IgM共同出现在B淋巴细胞上调节B细胞发育及其功能。

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