血清1,5-AG的测定方法

血清1,5-AG的测定有多种方法,包括气液相色谱法(GC)、气相色谱-质谱仪测定法(GC-MS)、高效液相法(HPLC)和酶反应比色法。其中吡喃糖氧化酶(PROD)反应比色法无需特殊仪器,而且灵敏、准确、成本低及操作简单,可作为实验室常规检测方法。基本原理为通过吡喃糖氧化酶(pyranose oxidase,PROD)催化,1,5-AG分子中的2位羟基与氧分子(O2)反应后生成1,5-脱水-D-果糖和过氧化氢(H2O2)(下图)。然后,H2O2和2,2’-aminoddi(3-ethyl-benzthiazoline-6-sulfonic acid,ABTS)在辣根过氧化物酶催化下出现显色反应,最后测定420nm时的吸光度来定量。

 1,5-脱水山梨醇的检测原理

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