为什么荧光原位杂交技术对显微计数有要求？

答：这是为了镜下计数的准确性而设定，根据标记荧光素的激发光与发射光波长，选择合适的荧光显微镜滤片。选择苯基吲哚（destination access point identifier， DAPI）检测滤镜，在10倍物镜下找到细胞所在层面。转至40倍物镜，在不同滤镜条件下初步浏览杂交区域整体杂交情况，杂交信号应分布75%以上间期细胞核中。转至100倍油镜，从杂交区域的左上角起按从左至右、自上而下的顺序逐条扫描，观察染色体中期分裂象与间期细胞核中的杂交信号。要注意使用添加防淬灭剂的显微镜油。初诊标本由两人分别计数200个细胞，或由一人随机选取不同杂交区域分别计数200个细胞，计算信号异常率。复查标本计数1000个细胞，并与初发标本异常情况对应比较。