答:修复抗原是因为常规的石蜡切片标本均用甲醛固定,使得抗原性物质形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇;蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。由此在染色时,要进行抗原修复或暴露。修复的方法有:

  1. 化学方法主要是通过一些酶的作用,使抗原决定簇暴露,如胰蛋白酶主要用于细胞内抗原的显示、胃蛋白酶主要用于细胞间质抗原的显示;
  2. 水浴加热法将玻片放入装有抗原修复液的容器中,加热至沸腾,持续10~15分钟;
  3. 微波照射法将玻片放入装有抗原修复液的容器中,置微波炉加热至95℃以上,持续10~15分钟,冷却后按免疫组化染色步骤进行。此方法由于微波场内极性分子、离子高速运动,撞击交联的网链,使抗原异常的构象恢复正常,且因分子运动产热、效率高、时间短,对抗原再现效果好;
  4. 高压加热法暴露抗原将玻片浸入抗原修复液内,置高压锅中高压2~3分钟,可取得极好的效果。由于高压下受热均匀,特别使用于大批量标本的染色;
  5. 酸水解法可使交联断裂、暴露抗原。将玻片浸入每升1mol盐酸溶液中,室温作用20分钟(温度升高,作用时间缩短)。此法能增强特异性染色,降低背景,但需注意水解过度将破坏抗原性及形态结构。
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