睾丸疾病的诊断之:精液精子常规检查

近几十年来,男性精液的质量下降,精液量和正常精子数目减少,而泌尿生殖系统疾病,如尿道下裂和隐睾等的发病率上升,睾丸肿瘤在一些地区的发病率增加。因而精液常规检查项目的正常参考值需要重新制定。首次就诊的患者应作两次精液检查,中间间隔7~9天。如果两次检查的结果相差悬殊,则应作第3次检查。精液采集需包括射精过程的全部精液,有部分遗洒或收集不完全的标本不能进行分析。留取的标本最好立即送检。如果在家中留取标本,应在1小时内送检,途中保持温度在20~40℃。如果检查直线运动精子少于25%,那么下次标本应在实验室留取。

精液收集与保存是确保检测质量的关键

盛接精液的容器应是清洁的广口玻璃或塑料瓶,如用塑料瓶,应预先检查对精子有无毒性,容器的温度不宜过低,以免发生精子冷休克反应。不能用普通的避孕套收集精液,因为避孕套对精子的活力有影响;也不能用中断性交的方法留取精液。性交中断时,往往已射出精液的开始部分,不能完整收集全部精液。同时阴道内的酸性分泌物、脱落细胞和细菌会影响分析结果。如果需要做精液细菌学检查,标本的采集应遵循无菌原则,受试者预先排空膀胱,清洁双手和阴茎,盛接精液的容器应事先灭菌消毒。

精液检查应确保可重复性和项目齐全

一般项目

精液的一般检查应包括外观、容量、黏稠度和pH值。正常精液为灰白色混浊物,含有血液时呈棕色。射出体外后5分钟内凝固,室温下在60分钟内自行液化。一份收集完整的精液标本容量为2~6ml。当正常已液化的精液从21G(内直径0.8mm)注射针头挤出或从垂直放置的5ml吸管内依重力自然滴落时,正常精液为细滴,不连续成线。过于黏稠(可能为黏液含量过多)的精液则延续为超过2cm长的液线。也可用毛细玻璃管法测量黏稠度。将1滴已液化的精液涂布在pH试纸上,可测出精液的pH。正常精液的pH为7.2~7.8。pH7.8以上提示生殖道感染;pH7.0以下时,可能存在输精管、精囊或附睾发育不全和无精子。

精子活力

主要包括活动率和直线运动率与活精子密度。将已液化和混匀的精液从21G针头滴出1滴(10~15μl)于清洁载玻片上,覆以20mm×20mm或24mm×24mm盖玻片,在18~24℃室温下放大400~600倍观察,可看到4类精子运动:①迅速直线前进运动;②缓慢直线或非直线前进运动;③无前进运动;④不动。连续观察100个精子,计算出①和②类精子的百分率。最好用第2滴精液重复检查后再发报告。前进运动(包括①和②类)精子占50%或以上,且迅速直线前进运动精子占25%或以上者可认为正常。

将50μl混匀的精液按1∶20比例加入稀释液,滴于覆以盖玻片的血细胞计数板上,在湿润的小盒内放置5分钟,放大200~400倍观察,计数形态完整的有尾精子及每毫升的精子数。正常值为每毫升含20×106个精子或以上,总计数为40×106或以上。精子的存活率是指活精子所占精子计数的比例。通常用伊红或伊红-苯胺黑染色法识别死精子,其原理是死精子的胞膜有破损,染料可以通过破损口进入细胞内使精子染色。在显微镜下计数100个精子,算出没有染色的活精子百分率。正常人活精子应占50%以上。

精子形态分析

正常形态精子比率应占50%以上。精子形态学分析以精子涂片染色为基础,方法有改良的Papanicolaou染色(巴氏染色)、Giemsa染色、Bryan-Leishman染色、Shorr染色或Simple快速染色法。改良巴氏染色可以清晰地显示精子的头顶体区、顶体后区、中段和尾部,分辨出生精细胞和其他细胞,而且适合于各种黏稠度的精液标本。该方法在国际上普遍采用。用1滴(10~15μl)精液制成薄推片,用改良巴氏染色,在油镜下观察精子形态,计数100~200个精子,算出正常精子百分率。

正常精子的头部为卵圆形,长与宽的比值为1∶5~1∶75,顶体占头部的40%~70%,没有颈段、中段或尾段缺陷。以下各类精子为形态异常精子:①头部缺陷:大头、小头、锥形头、空泡头和双头;②颈段和中段缺陷:膨胀、卷曲和形态不规则等;③尾部缺陷:断尾、多尾和卷尾等;④细胞质微滴:大于正常头部的1/3者。正常形态精子占50%以上为正常。

非精子细胞成分和精液培养

是诊断生殖道感染的重要方法。除精子外,精液还含有尿道上皮细胞、未成熟的生精上皮细胞和白细胞等。这些细胞统称为圆细胞,对圆细胞特别是白细胞进行计数有重要意义。正常精液圆细胞数应低于5×106/ml,白细胞总计数在1×106/ml以下。白细胞数过多提示泌尿生殖道炎症。生殖道感染可影响精液量、精子密度和活力。疑有生殖道感染时,应进一步做精液培养。受试者先排空膀胱,用肥皂液清洁阴茎和双手,用无菌容器盛接精液,精浆分别作需氧和厌氧培养。

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