酶促比色法原理公式

试剂

0.1mol/L 1,4-六氢丫嗪二乙醇磺酸(PIPES)缓冲液(pH 6. 8)
  1. 4-氯酚:5. 4mmol/L
  2. 表面活性剂:少许
  3. 叠氮钠:1g/L

酶试剂

  1. 4-氨基安替比林:0. 4mmol/L
  2. 过氧化物酶:≥200U/L
  3. 乳酸氧化酶:≥150U/L
  4. 使用时,按需要量,用1试剂溶解2试剂,在2~8℃稳定6周。

乳酸标准(2. 22mmol/L)

操作方法

使用含有肝素氟化钠抗凝剂的血浆测定(下表)。混匀在37℃保温5分钟后,在505nm波长处用试剂空白管调节零点,读取各管吸光度值(A)。

全血乳酸测定法

全血乳酸测定法

乳酸计算

参考区间:安静状态下健康成年人空腹静脉血,乳酸浓度一般低于2mmol/L(0. 6~2. 2mmol/ L)。动脉血中乳酸水平为静脉血中乳酸水平的1/2~2/3。餐后乳酸水平比基础空腹值高20%~50%。新生儿毛细血管中的乳酸水平比成年人的水平约高50%。CSF乳酸水平与血液乳酸水平无关。0~16岁儿童的脑脊液乳酸水平为1. 1~2. 8mmol/ L。健康成年人24小时尿液乳酸排出量为5. 5~22mmol/d。

附注

应在空腹及休息状态下抽血。抽血时不用止血带,不可用力握拳。如非用止血带不可,应在穿刺后除去止血带至少等待2分钟后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血,抽取后立即注入预先称量的含有蛋白沉淀剂(预冷至4℃)的试管中。如用血浆测定,每毫升血用10mg氟化钠及2mg草酸钾抗凝,立即冷却标本,并在15分钟内离心。

高脂血症样品应做样品空白,用试剂1代替工作试剂。计算时间去除吸光度。

临床意义

1.乳酸增高引起酸中毒,一般分为A、B两型。

A型:引起组织缺氧的疾病。

  1. 休克:中毒性肺炎;心源性;败血症。
  2. 充血性心力衰竭。
  3. 一氧化碳中毒。

B型:无明显缺氧的。

  1. 糖尿病:丙酮酸/高渗性昏迷,有30%~50%的患者乳酸增高。
  2. 药物引起:双胍类降血糖药物。双胍类降血糖药物是通过抑制胃肠道对葡萄糖的吸收以及抑制糖原异生和氧化代谢降低血糖,同时刺激乳酸生成和损伤肝脏,对乳酸的代谢作用,引起血液中乳酸增高。
  3. 肝脏衰竭。

2.除了用血液测定乳酸,用于诊断由于糖尿病等各种疾病引起的乳酸中毒外,还可以通过脑脊液、尿液的乳酸含量,帮助确定炎症的性质。

  1. 细菌性、结核性脑膜炎时,因脑脊液中含有细菌,并伴有组织缺氧,导致糖的无氧酵解增加,加速乳酸生成,又由于脑膜炎症水肿,对乳酸的清除能力下降。所以脑脊液中乳酸含量高于3. 9mmol/L,病毒性脑膜炎低于3. 0mmol/L。
  2. 测定尿液中的乳酸可鉴别上尿路与下尿路感染(肾盂肾炎)。由于肾盂肾炎或上尿路梗阻,引起肾实质缺氧,乳酸重吸收作用障碍及对内生性乳酸的清除率下降,导致尿液乳酸升高。

3.糖原累积症,把运动前后血乳酸测定的变化作为诊断的指标。

4.生理性的血乳酸增加 激烈运动时,能量的需要增加,糖分解加速,需氧量增加,体内处于相对缺氧状态,糖酵解过程中产生大量乳酸。所以乳酸测定可以作为体育运动的训练运动量的指标。

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