答：测定血浆游离血红蛋白的方法有色原比色定量法、直接分光光度法和免疫学检测法等。临床上常用的是色原比色定量法。血红蛋白中亚铁血红素具有类过氧化物酶活性的作用，在过氧化氢（H2 O2 ）参与下，可催化H2 O2 释放新生态氧，使无色的邻联甲苯胺发生脱氢氧化而呈蓝色，吸收峰在630nm处，加入强酸（pH 1.5）后呈黄色，吸收峰为435nm。根据颜色深浅，与同时测定的标准血红蛋白液对照，可求出血浆游离血红蛋白的含量。经典方法虽用联苯胺做色原，因其具有致癌性，但可采用2，4，6-三溴-三羟基苯甲酸（HBHBA）做色原，灵敏度及准确性都提高，且无毒性，因此，可用色原比色定量法来测定血浆游离血红蛋白。
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