答:用醋酸纤维薄膜(醋纤膜)电泳法进行血红蛋白分析的实际应用中,影响因素众多,样本保存条件、电泳样本浓度和电泳条件都会影响分析结果,要完成好的电泳图谱有一定的难度。在具体实验过程中有下列注意事项:

  1. 检测使用EDTA抗凝全血样本,样本可置于4℃环境保存,避免使用溶血样本;
  2. 制备好的血红蛋白溶液置于4℃保存不能超过1周,冷冻时可保存数月,避免反复冻融;
  3. 严格控制各种实验条件,以免影响电泳的分析结果,若检测到异常血红蛋白,又与常见的异常血红蛋白S、C、D、E不同时,可使用其他方法检测;
  4. 血红蛋白电泳的样本宜稀释1~2倍,使区带更为清晰、整齐,HbA与HbA2 之间应距离6mm以上的空白区域。HbA2 定量时点样量宜为10μl,对于中度或重度贫血的病例,点样量应增大为15μl或20μl,以提高检测结果的准确度;
  5. 电泳时间不能太长,电泳时醋纤膜不能变干,故应观察到HbA和HbA2 清晰分开就停止电泳,电泳时间太长区带反而扩散模糊;
  6. 应同时作正常人和必要的已知异常血红蛋白的标本对照。
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