为什么抗球蛋白试验阴性不能排除自身免疫性溶血性贫血？

答：抗球蛋白试验（Coombs试验）是诊断自身免疫性溶血性贫血（AIHA）最有价值的试验，但AIHA患者中有2%～10%该试验阴性，其原因：

1. 红细胞表面免疫球蛋白（Ig）过低，低于检测试剂的阈值；
2. 低亲和力IgG，常温洗涤红细胞时抗体脱落，改用4℃低温条件下和低渗溶液洗涤处理，则阳性；
3. 患者为IgA或IgM型抗体，而检测试剂常常仅包括IgG，C3；若改用单独特异性抗IgA或IgM抗体，则可呈阳性；
4. AIHA患者体内存在着针对不同阶段红细胞的自身抗体，发育不同阶段的红细胞上结合的抗体量有所不同，部分患者的自身抗体只针对有核红细胞，而产生原位溶血，常规的直接抗球蛋白试验（DAT）则不能检出。

提高Coombs试验灵敏度的方法包括：微柱凝胶法、流式细胞术、红细胞表面免疫球蛋白定量分析等。另外，骨髓单个核细胞DAT可弥补外周血DAT仅检测成熟红细胞自身抗体的不足，对于怀疑为AIHA的患者同时进行常规Coombs试验及骨髓单个核细胞DAT，对外周血DAT阴性AIHA的诊断具有重要意义。因而，当临床表现及相关实验室检测均支持AIHA、而Coombs试验阴性时不能排除本病。