为什么检测耐万古霉素肠球菌需用表型筛查试验与基因确证试验

答：耐万古霉素肠球菌包括天然耐药肠球菌（如鹑鸡肠球菌、酪黄肠球菌）和获得性万古霉素耐药肠球菌（主要包括屎肠球菌、粪肠球菌）。参照美国临床和实验室标准协会推荐执行标准VRE的检测方法包括：

1. 纸片扩散法和MIC法：当抑菌圈直径≤14mm或者抑菌圈内有任何生长均为万古霉素耐药，抑菌圈直径为15～16mm为中介，抑菌圈直径≥17mm为敏感；MIC法检测耐药MIC>32μg/ml，中介MIC 8～16μg/ml， 敏感 MIC≤4μg/ml。
2. BHI琼脂筛选法：在含6μg/ml万古霉素BHI琼脂表面点种1～10μl 0.5麦氏（Mc-Farland）标准浊度菌悬液，35℃孵育24小时，有1个菌落均为万古霉素耐药观察结果。
3. 基因确证试验。探针杂交法或PCR扩增万古霉素耐药基因，包括vanA 、vanB 、vanC 、vanD 、vanE 和vanF ，临床常见为前三者。对于纸片扩散法中介耐药的药敏结果需采用BHI琼脂筛选法或MIC法确认。